实验总方案如下:
这里先说一下分组,总共有12个小组做这次的急性酒精中毒实验,每个小组对应的实验分组如下:
实验分组与例数
没有找到自己小组组号的同学也可以看一下后面的家兔灌胃视频和ALT生化检测方法。
分组依然是按照前面组为对照组,后面组为救治组的方式,这里想征询一下大家对分组的意见。
接下来就是实验操作了。
前面是我们很熟悉的家兔麻醉以及颈动静脉插管:
完成后需要记录各项指标,整个实验过程选取3个时间点的记录家兔的生理生化指标,分别是造模前、造模后30min和救治后60min。
各项观测指标及测定方法
生化指标为血中酒精浓度、ALT活性(反映肝细胞损伤程度)和MDA含量(反映细胞过氧化损伤程度),具体操作见老师课件。机能实验学常用生化检测方法记录下各项指标后便是家兔急性酒精中毒模型的复制。在预实验我们需要进行对家兔AAH模型的探索,即每组家兔(正常组除外)灌胃不同量的50%乙醇溶液,最后选取造模最成功的小组所对应的乙醇量作为正式实验的统一用量。各组的酒精灌胃量家兔灌胃技术家兔急性酒精中毒时各项生理指标的变化(实验以高剂量酒精中毒为准):各项生理指标的变化造模30min记录各项指标后,给予救治药物,各组给药量(以家兔体重计算)如下:
各组家兔给药剂量这里需要注意联合用药组(即葛根联合蜂蜜+沙棘汁组)的两种药品浓度加倍,用量减少一半,因为要确保每组家兔的给药量相同,都为7ml/kg。救治后60min再次记录各项指标后,就可以进行数据汇总了。整个实验耗时可能会比较长,主要是在测各项生化指标方面比较费时和费力,3个生化指标的测定都需要用到分光光度计,下面是分光光度计的使用注意事项:比色注意事项比色皿使用时注意不要沾污或将比色皿的透光面磨损,应手持比色皿的毛面。
待测液制备好后应尽快测量,避免有色物质分解,影响测量结果。
测得的吸光度A最好控制在0.2~0.8之间,超过1.0时要做适当稀释。
开关试样室盖时动作要轻缓。
不要在仪器上方倾倒测试样品,以免样品污染仪器表面,损坏仪器。
比色皿在盛装样品前,应用所盛装样品润洗两次,防止样品浓度被稀释。盛装样品时,高度为比色皿的2/3处即可。测量结束后比色皿应用蒸馏水清洗干净后倒置晾干。若比色皿内有颜色挂壁,可用无水乙醇浸泡清洗。
向比色皿中加样时,若样品流到比色皿外壁时,应以滤纸點干,镜头纸擦净后测量,切忌用滤纸擦拭,以免比色皿出现划痕。
测量过程中不可打开测量室的窗门,否则会影响测量结果的准确性。
同一样品比色皿一般应重复测三次,取平均值。
最后,祝大家实验成功探索性实验开题报告预览时标签不可点收录于话题#个上一篇下一篇